实验室无菌操作规章制度

第1篇：实验室无菌操作规章制度

实验室无菌操作规章制度

在日新月异的现代社会中，各种制度频频出现，制度对社会经济、科学技术、文化教育事业的发展，对社会公共秩序的维护，有着十分重要的作用。一般制度是怎么制定的呢？下面是小编为大家收集的实验室无菌操作规章制度，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。

1.洁净区内器械消毒灭菌要求

1.1无菌区外的器械清洁消毒

1)配平天平：每周至少消毒1次，表面用蘸84消毒液的无尘纸擦拭，再用75%医用酒精擦拭。

2)台式冷冻离心机内腔及适配器：每日操作结束时用75%医用酒精对离心机内腔以及适配器内外表面进行充分消毒，并整齐摆放于实验台晾干备用。

3)光学显微镜及倒置显微镜：每周对显微镜至少清洁消毒1次，用无尘纸擦拭显微镜台面及外表面，用镜纸蘸95%乙醇擦拭镜头和目镜。

4)疫苗箱洗涤消毒：对于用过的疫苗箱应每天用配制的84消毒液浸泡过夜，再用自来水冲洗表面，无尘纸擦拭箱内表面。

1.2无菌操作区内的器械清洁消毒

1)手动移液器消毒：手动移液器表面应每周用75%医用酒精清洁消毒，将手动移液器吸头取下，更换过滤膜后再装上吸头;将手动移液器放于试验台充电，充电并消毒后放回无菌操作台原位，使用前还应开启无菌台内紫外消毒30min。

2)剪刀、镊子、止血钳及不锈钢器械：不锈钢器械每处理一份标本都应更换，使用过的器械应用戊二醛浸泡2h，此后用自来水冲洗至少20遍，再用去离子水冲洗3遍，用纱布擦干后经包布包裹放入干净的消毒盒中，贴上灭菌标签并标记日期，采用湿热灭菌121℃/30min，灭过的器械放洁净储物箱备用。

3)无菌枪头的灭菌消毒：无菌枪头至少每周灭菌1次，戴PE手套将待灭枪头装入枪头盒，盖好后用灭菌胶带封口并标注日期后，进行湿热灭菌，灭菌完成后放烘箱烘干，经传递窗放入洁净区待用。

2操作过程的无菌操作要求

2.1无菌操作要求

1)无菌操作时应穿无菌洁净服、戴口罩、鞋套、手套，进入无菌操作区前对手套，手腕、前臂、胸部等部位的洁净服进行75%酒精消毒;无菌操作过程中应每隔15min对手套，手腕、前臂、胸部等部位的洁净服进行75%酒精消毒。

2)无菌操作中应减少进入洁净室的人员数量;无菌操作中，操作人员应注意力集中，不可

与其他人员交谈(工作需要除外);非操作人员应尽量远离无菌操作区(学习、培训除外)，严禁在无菌操作区附近做大幅度动作，大声讲话，走来走去;打喷嚏、咳嗽应立即前往缓冲间处理，并对洁净服进行全面消毒，方可进入洁净室。

3)物料、器械进入无菌操作区前应用75%医用酒精充分消毒，开启紫外照射30min(严禁紫外照射的`物料除外)，方可在无菌操作区中使用。

4) 无菌物品应定期消毒并有明确的灭菌标识，保证在灭菌有效期内使用，超有限期的物品应重新清洁灭菌后使用。

5) 无菌操作过程中，发生手套破损，应立即更换手套，对手套进行消毒，并对可能出现污染的物料及器械进行更换;如发现无菌物料包装出现破损，应立即更换包装完好的无菌物料，做消毒处理后使用，出现破损的无菌物料做废弃处理;操作过程中，无菌器械被污染(掉落地面、接触非无菌物品等)，应立即移出无菌操作区，取备用无菌器械使用。

6)在操作CO2培养箱时，应严格按照CO2培养箱使用标准操作规程操作，并用75%医用酒精对手部、双臂、胸部、头部等部位进行充分消毒，然后在进行开箱操作;培养结束后，应用消毒剂对CO2培养箱进行全面清洁消毒，并定期用紫外照射30min，以免培养箱染菌。

7)操作完成后，应立即对无菌操作区进行清场，清除操作产生的垃圾，并对操作台进行全面清洁消毒，并紫外照射30min;器具应用75%医用酒精充分清洁消毒，摆放整齐;剩余物料应放回储物箱，摆放整齐，盖上储物箱。

8)质保员负责定期对实验室清洁消毒效果进行取样验证，实验室负责对不合格区域进行重新清洁消毒，直至检测合格。

2.2无菌物品打开程序

1)经过灭菌的无菌物品包括消毒盒和消毒包，应经无菌操作打开;开启前应对手套充分消毒，用75%医用酒精喷遍每个手套及与手套接触的洁净服袖口。

2)消毒盒应在无菌工作台中心位置开启，开启时注意不能用手或衣袖触碰消毒盒内侧任何部位，拿取盒内物品时必须用消毒过的镊子并夹在无菌器具的手持部位，用过的器具不得再次放回无菌盒。

3)消毒包应在洁净区物品使用处，开启时应查明消毒日期，将消毒包逐层打开，注意不能用手或衣袖触碰消毒包内侧任何部位，消毒一旦打开不应再次包裹领取他用。

2.3开启试剂瓶、装液袋的无菌操作程序

1)试剂瓶开启前要用75%医用酒精充分消毒，先用酒精棉球清除表面浮尘，再用洁净棉球从瓶盖与瓶口接触处开始消毒，将整个瓶盖和瓶口下2cm都进行消毒;如有保护外盖应首先用剪刀或镊子移除，然后用酒精棉球清除附着的残留碎屑，再用酒精充分消毒;如非首次开启使用口的试剂瓶，也应对瓶口和瓶盖进行酒精消毒方可打开。

2)瓶口消毒后，用无菌镊子取下瓶盖，并使瓶盖内口朝上放于无菌台安全位置;如开启后试剂剩余大量，需再次消毒瓶口和瓶盖，盖好后采用无菌封口膜密封，并标注使用日期和使用人，放4℃冰箱留下次用。

3)装液袋(血袋或细胞输注袋)应直立放置在洁净操作台安全区，尽量在密闭条件下进行液体转移，需要打开时应先充分消毒;对待开启部位上下2cm处先用碘伏消毒，再用酒精消毒，最后用无菌剪刀将导管剪开或用针头穿刺取得袋中液体。

2.4无菌液体转移操作程序

1)无菌液体转移应在密闭或尽可能少的敞口开放的时间的情况下进行，转移前应对接口部位充分消毒，液体试剂使用后需要保存的，应消毒后密封并标注使用日期和使用人。

2)需要开放转移的液体，应采用电动移液(分液)器和一次性无菌移液管操作，取下的瓶盖应使瓶盖内口朝上放在正前方的安全区域，操作中应尽可能避免手或手臂干扰敞口容器上方气流。

3其他说明

上述无菌操作管理要求，已在相关的设备及制备工艺操作规程中有部分体现，应结合实际操作执行。

第2篇：实验室无菌操作规章制度

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1.目的

规范无菌操作流程，减少及避免发生染菌现象出现。

2.使用范围

无菌室及洁净区的操作。

3.无菌操作技术原则

3.1 环境要清洁，在每次无菌操作结束后都需要对环境进行清理、清洗；且避免操作前进行清扫。

3.2 做好个人卫生，进入无菌室前需修剪指甲、洗手，穿好无菌服，帽子需遮住所有头发，口罩遮住口鼻。

3.3 在无菌操作时，不可讲话，打喷嚏，对怀疑染菌的无菌物品，不可使用。

4.内容

4.1.1准备：工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲；备齐用物（如：接种针、接种环、酒精灯、斜面、平皿、摇瓶、75%酒精棉、无菌水等）；核对无菌用品，接种菌种的种类、型号。

4.1.2 所有实验使用的物品都需要进行消毒、灭杀；进入洁净区前需要经传递窗进行紫外表面消毒30min以上；

4.1.3 开始实验前需要打开超净台的紫外灯，消毒半个小时以上；超净台避免放入过多的物品（一般只放入当次的实验所有的物品），所使用的试剂和耗材都需事先进行灭菌（灭菌日期超过4天的需重新消毒）。

4.1.4 进入洁净区前关闭紫外灯，并打开风机，等待半个小时以上，使臭氧尽量排放干净。 4.1.5 除去手腕等部位的饰品，穿好无菌服，戴好头套、口罩，做到“三不漏”：不暴漏头发，不暴漏口鼻，不暴漏躯干皮肤和衣物。 4.1.6双手要进行清洗、消毒。

4.1.7要经风淋室风淋30秒后再进入洁净室。 4.1.8在局部百级区域操作要戴一次性无菌手套。 4.1.9 实验操作过程中应尽量减少进入洁净区的人员（不超过4人/间）并尽量减少人员走动。 4.1.10 所有要放入超净工作台的物品都需进过消毒液喷洒擦拭消毒。

4.1.11无菌物品若取离超净台则视为已污染，不得放回再用；无菌液体在取离超净台前必须密封其开口；密封的无菌液体容器在放入超净台后，对其开口前须对开口在酒精灯火焰上烧烤。

4.1.12在拆开任何一次性无菌使用耗材的包装时都要在超净台内完成，并须同时保证与细菌直接接触的使用端/面不得与超净台内的任何物品发生触碰。 4.1.13工作台面上的用品要放置有序、布局合理，一般说酒精灯（当工作不需要时也可不用）在中间，右手使用的物品在右侧，左手使用的物品在左侧。工作时忌忙乱而要有序。 4.1.14 开始操作前先用医用酒精对双手进行消毒。 4.1.15点燃洁净工作台内的酒精灯，在打开/关闭试剂瓶口、试管口时应将瓶口或者试管口过火；接种针、接种环在使用前或在与台面发生碰触后应经过火焰的灼烧；接种针/接种环过火操作方法为：使其头部到身部反正面在火焰上各烤燎通红；烧过的器械要冷却后才能使用，以免对细菌造成损伤。

4.1.16操作前试管（或摇瓶）口需要在火焰上方反转镣铐两周。 4.1.17操作时左手拿试管（或摇瓶），右手拇指、食指、中指操作接种针（接种环），右手小指和无名指夹住瓶塞，取下瓶塞，瓶塞再反转镣铐两周后开始操作。 4.1.18在超净台内，尽量避免瓶口长时间敞开直立。

4.1.19盖封瓶口时，应将瓶口和瓶盖内面各自在火焰上燎烤两周再盖上瓶盖。

4.1.20实验用胶塞、橡皮乳头等橡胶和塑料用品在过火焰时也不能时间过长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养的细胞。 4.2 无菌液体标准转移程序：

4.2.1无菌液体的转移须在超净台进行，转移过程要尽量保持密闭，必须用移液管或移液器来完成操作；

4.2.2 移液管上方口应塞入棉絮（脱脂棉），用牛皮纸包好进行消毒灭杀；

4.2.3无菌液体瓶再封口时，须将瓶口和瓶盖分别燎烤2周后再封盖；封盖后须贴上相应的标签；

4.2.4在使用移液管转移液体时，应保证移液管尖端距移液器边缘1cm以上；在使用移液管时，每次液体吸入量不应超过移液管的警示标记，更不能触及移液管上方的防尘棉絮；在使用移液管移出废液时，移液管尖端应距废液缸5cm以上；在将细胞悬液转移至培养瓶中时，移液管尖端应距培养瓶0.5cm以上；

4.2.5放置吸管时管口应向下倾斜，以防液体倒流入橡皮乳头内而引起污染或者损坏电动移液枪；

4.2.6向离心管、细胞冻存管、培养瓶、培养皿内添加液态物质时，所加入的量不应超过管上所标示的最大量；

4.2.7实验人员在操作时，应保证开口离心管或开口试剂的上方为不可逾越区；严格禁止采用双臂交叉的方式来拿取尚在开口状态的离心管或试剂瓶；在面向操作台工作时勿大声讲话或咳嗽，以免喷出的唾沫把细菌带入工作台面发生污染；

4.2.8在使用细胞刮刀时，手握部位应尽量远离培养瓶口，以防污染；

4.2.9如果在转移任何液态物质的过程中出现滴漏，则应立即使用消毒液浸泡的棉球或纱布擦净；

4.2.10使用完毕的实验耗材应在第一时间内处理完毕，避免堆积在超净台内或层流罩上，以防污染；

4.2.11当所有操作完成后，应及时使用消毒液对台面进行清理；擦拭完毕后再开启紫外灯照射一个小时。